发布日期：2024-10-04 20:46 点击次数：92
薄层色谱，或称薄层层析(thin-layer chromatography)，所以涂布于撑持板上的撑持物当作固定相，以得当的溶剂为流动相，对夹杂样品进行定性与定量分析、分离和纵情的一种层析分离时代。20世纪50年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来的一种平面色谱时代;至20世纪60年代后，东谈主们对薄层色谱法在使用器材的规格、操作才略及术语使用的程序化等方面进行了多数的责任，使该才略日趋纯熟和完善天天影院网址，泛泛地应用于有机合成中。TLC薄层层析时代当作有机合成中，最径直的监测响应的技能，本文对其施行进行通俗的先容。
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旨趣: 色谱法的基快乐趣是欺诈夹杂物中各组分在某一物资中的吸附或熔化性能的不同，或和其它亲和作用性能的相反，使夹杂物的溶液流经该种物资，进行反复的吸附或分派等作用，从而将各组份分开。
特质: 样品分离量少(微克~毫克级)，分析快速。
分类: 按所用固定相材料不同，分为吸附、分派、离子交换、凝胶过滤等薄层层析。有机合成中常用的硅胶，氧化铝薄层属于吸附色谱。
比移值（Rf）：化合物出动的距离大小用Rf值来抒发。这是一个位于0～1之间的数值，它的界说为：化合物最高浓度中心距离原点基线（首先点样时仍是笃定）的距离除以溶剂的前沿距离原点基线的距离。
点样----到手分离的关节
1、点样原点小而圆，直径尽量不要提升2mm（有机溶剂尽量用0.3mm直径毛细管，水等高粘度的溶剂用0.5mm直径的）;
2、在便于显色的前提下，点样量尽量少，防患过载拖尾或隐秘Rf支配的点;
3、点样勿伤及薄层名义;
4、点样原点尽量阔别薄层角落，至少相隔3mm， 减少角落效应（角落宽阔跑歪）;
5、聘任章程的矩形薄板;
6、扫数点样点要保持在一条与底边平行的直线上，程序点对照时，务必点交叉点；
7、点样完后，溶剂用电吹风尽量吹干。
伸开剂的聘任：化合物在薄板上出动距离的几许取决于所及第的溶剂不同。在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物资不会出动，然则非极性化合物会在薄板上出动一定距离。相背，极性溶剂宽阔会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。一个好的溶剂体系应该使夹杂物中扫数的化合物皆离开基线，但并不使扫数化合物皆到达溶剂前端，Rf值最佳在0.2~0.8之间。诚然这个条款不一定皆能兴隆，但这应该当作薄层色谱分析的盘算推算（在柱色谱中，得当的溶剂应该兴隆Rf在0.2~0.3之间）。那么，应该及第哪些溶剂呢？一些程序溶剂和他们的相对极性列于如下：【有机溶剂极性表】
常用伸开体系极性大小功令
石油醚<正己烷<二氯甲烷<四氢呋喃<乙酸乙酯<丙酮<正丙醇<甲醇<水
常用的夹杂体系
EA/PE(hexanes)，DCM/MeOH
PE/DCM，PE/Acetone，Ether/DCM，EA/DCM，Acetone/DCM
伸开剂的聘任原则
1、对所需要素有风雅的熔化性;
2、可使各要素间有较好的分离；
3、待测组分的Rf在0.2~0.8之间；
4、不与待测组分发生化学响应;
5、沸点适中，黏度较小;
6、伸开后组分黑点圆且荟萃;
7、夹杂溶剂最佳清新配制。
伸开：
1、尽量用新配制伸开剂(万古期蒸发后比例会调动);
2、伸开缸盖子密封性要好;
3、伸开剂用量适中，不成漫过点样原点;
4、薄层板侧边不成贴到伸开缸壁;
5、薄层板尽量用镊子夹住防御放入伸开缸中，而不是用手持住放入;
6、让溶剂朝上伸开约90%的薄板长度；
7、理念念的伸开位置为保证Rf值在0.2~0.8之内。
看板----一看、二照、三碘、四显
1、从伸开池中取出薄板况兼立时用铅笔标注出溶剂到达的前沿位置， 阐明这个狡计Rf的数值;
2、用镊子防御取出薄层板，吹千溶剂;
3、最初径直不雅察，画出有色物资的黑点位置;
4、在紫外灯下不雅察有无暗斑或荧光黑点（并用铅笔画出黑点位置）;
5、大部分有机物会吸附碘，可逆的产生棕色或黄色黑点;
6、千万从容，等高的点，不一定是消亡个物资，有可能是极性疏通的点，需要用其他监测才略（如LCMS）笃定。
7、用交集性式样不雅测薄板。当化合物莫得紫外活性的时候，只可收受这种才略。在【有机合成中常用TLC显色剂汇总】中，提供了好多止境有用的染色剂。使用染色剂时，将干燥的薄板用镊子夹起并放入染色剂中，确保从基线到溶剂前沿皆被浸没。用纸巾擦干薄板的后面。将薄板放在加热板上不雅察黑点的变化。在黑点变得可见而且布景面孔未能守密住黑点之前，将薄板从加热板上取下。
女同a片TLC-MS联用
用小板点成带状，分离少许的样品，刮取a、b、c三个纯点，MS检测出哪个点可能是咱们的产物，获取标样，再伸开prep-TLC得到纯化后样品，作 NMR纵情。
TLC监测响适时机: 关于不领略的化合物各个时机点最佳皆要监测。
1、响应半小时;
2、响应过夜前后，TLC检测并留样:
3、后处理前后，TLC检测并留样;
4、样品拌硅胶前后，TLC检测并留样;
5、机分样品浓缩冻干前后，TLC检测并留样。
TLC为柱分离寻找条款
1、聘任不同的夹杂体系， 屡次尝试，如若念念让Rf变得更大一些，可使溶剂体系极性更强些；如若念念让Rf变小，就应该使溶剂体系的极性减小些。如若在薄板上点样形成了条纹状而不是一个圆圈状，那么你的样品浓度可能太高了。稀释样品后再进行一次薄板层析，如若如故不想法效，就应该辩论换一种溶剂体系。
2、找到盘算推算物Rf值0.2傍边，并与其他杂质分离度较大的系统;
3、然后阐明样品分离度，硅胶规格，柱径比，硅胶与样品比例等空洞信
息，聘任比Rf值0.2傍边体系稍小极性的体系进行柱层析。
Prep-TLC分离样品：具体请看往期著作【制备薄层色谱（爬大板）纯化操作经过】
样品要求：因为硅胶板是弱酸性的，对酸不领略的化合物尽量幸免爬大板；对空气，水，有机溶剂领略； 低沸点的溶剂里要好溶；最佳有紫外给与；极性不成太大（至少伸开剂能爬起来）。
上样：尽量少的溶剂熔化样品，最佳是易蒸发的，二氯甲烷最常用，如若不溶不错加几滴甲醇促溶。不错用一次性滴管塞棉花后剪成羊毫状上样，每个东谈主的主见皆不同，小编等于这样弄的，趁机练练羊毫字。上样时也最佳像写羊毫字相通一气呵成，这样跑出来的带比拟均匀。如样品溶液太多需要上两遍样，先用吹风机吹干溶剂后再上样。
跑板：伸开剂的聘任，先用小板爬样，具体若何爬小板，选到得当的伸开剂后，配好溶剂爬大板，由于大板和小板由幽微的阔别，大板伸开剂的极性不错略略比小板伸开剂的极性大一丝，相通的话也问题不大。跑板最佳要跑到快尖端1cm傍边，充分伸开样品，切记不要跑过，跑过的话，极性小的点可能会被伸开剂冲皆沿途，而极性大的点诚然不会冲到上头，但会变散，阻截易判断色带的角落。
检测：居品的判断，通过极性约莫判断哪几个色带可能是居品，然后每个色带不错先刮一丝，碾碎，加甲醇熔化，过滤送LCMS检测判断。
刮板：判断好色带后，在紫外灯下，用铅笔描好荧光带，运行刮板。带好口罩很伏击，小编是用好意思工刀刮的，刮不干净的不错用小板刮不错刮干净。
洗脱：刮好的硅胶，量少的话，不错隔着称量纸用试管擀碎。量多的话，径直装到自命袋内部粗陋摧毁，直到成粉末阻抑。粉末状的硅胶样品的洗脱，大部分东谈主是径直加溶剂泡出来。但小编用的是，把硅胶粉径直装到柱子（有底层砂芯的那种）里，表层铺一薄薄的石英砂，径直像过柱子相通在表层加溶剂压出来，这种才略的自制等于，关于熔化性不好的样品不错快速洗出，用相对较少的溶剂洗出居品。加入溶剂洗脱的时候不错随时点板看居品是否仍是透彻洗出。
常见拖尾原因及处罚主见
1、最初辩论的是样品浓渡过大，薄层板过载导致。这种情况径直裁汰样品浓度大概是上样量就不错考证了。2、样品对硅胶的吸附武艺过强导致的拖尾。对不同体系加入不同的调换剂，酸体系加冰醋酸或甲酸，碱体系加氨水、三乙胺或二乙胺。3、伸开剂的极性与样品极性不附，不成作念到有用展设备致。不错通过调换伸开剂极性处罚。4、如若是长带状，那最可能的原因是伸开剂对样品的熔化度不够所导致。不错阐明极性表换极性支配的对样品熔化度更好的溶剂作念伸开剂，另外样品未熔化透彻，点在班上的样品有未溶固体样品也会导致长条状拖尾。
【参考相干著作：TLC点板拖尾攻略】
TLC显色剂汇总
4-甲氧基苯甲醛显色 (广谱显色剂)原料 ： 1. 4-甲氧基苯甲醛 (p-anisaldehyde) 13mL 2. 醋酸 (AcOH) 5mL3. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 18mL4. 酒精 (EtOH) 478mL
调配才略： 把1，2，4在冰浴条款下夹杂后，渐渐滴加3，冷藏保存。
磷钼酸显色剂 (广谱显色剂，零散是含有羟基的化合物)原料： 1. 磷钼酸 (12MoO3.H3PO4) 5g 2. 酒精 (EtOH) 100mL
调配才略： 把1，2夹杂成溶液
从容：需要强热才能显色
铈 – 钼酸铵显色 笔名：HANESSIAN染色液(广谱显色剂)原料： 1. 钼酸铵 ((NH4)6Mo7O24・4H2O) 25g 2. 硫酸铈 (Ce(SO4)2) 5g3. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 50mL4. 蒸馏水 (H2O) 450mL调配才略： 把1，2，3，4夹杂后即可使用
硝酸铈铵 (适用于：大分子醇类)
原料：
1．1%硝酸铈铵的0.2mol/L硝酸溶液；
2. N，N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇(128ml)、水(25ml)与乙酸(1.5ml)夹杂液
调配才略：将(1)与(2)等量夹杂。
喷板后于105℃加热5min。
茚三酮显色 (适用于：胺基化合物)原料： 1. 茚三酮 ((ninhydrin) 0.3g 2. 醋酸 (AcOH) 3mL 3. 正丁醇 (n-BuOH) 100mL 调配才略：把1，2，3夹杂成溶液即可。
小窍门：关于比拟难显色的胺基化合物， 把TLC蘸一下HBr溶液加热烤一下后再蘸取茚三酮显色剂
二硝基苯肼显色 简称：DNP显色 (适用于：醛或酮类)原料： 1. 2，4-二硝基苯肼 12g 2. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 60mL3. 蒸馏水 (H2O) 80mL4. 酒精 (EtOH) 200mL调配才略： 把1，2，3，4夹杂成溶液即可。
碱性高锰酸钾显色 (广谱显色剂，零散是规复性化合物)原料： 1. 高锰酸钾(KMnO4) 1.5g 2. 碳酸钾 (K2CO3) 10g 3. 氢氧化钠 (NaOH) 0.125g 4. 蒸馏水 (H2O) 200mL调配才略： 把1，2，3，4夹杂成溶液即可。
从容重点： 试剂寿命比拟短，一般三个月以内就得再行树立。
硝酸银/过氧化氢 (适用于：卤代烃类)
原料：
1. 硝酸银0.1g溶于水1ml
2. 2-苯氧基酒精l00ml溶于丙酮200mL
3. 30%过氧化氢1滴
调配才略： 把1，2，3夹杂成溶液即可。
才略：喷后置紫外光下照耀；
表象：黑点呈暗玄色。
氯化铁 （适用于：酚类、羟酰胺酸）
原料：1%～5%氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液。
表象：酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。
溴甲酚绿显色 简称：BCG显色 (适用于：羧酸类等含有酸性基团的化合物)原料： 1. 溴甲酚绿(Bromocresol green) 40mg 2. 酒精 (EtOH) 100mL3. 0.1N 氢氧化钠水溶液 适量
调配才略：把1，2夹杂后，往内部滴加3直到溶液形成蓝色。
过氧化氢 （适用于：芳醇酸）
原料：0.3%过氧化氢溶液。
使用才略：喷后置紫外光(365nm)下不雅察。
表象：呈强蓝色荧光。
DRAGENDORFF试剂显色 (适用于：含氮化合物)原料： 1. 次硝酸铋 (Bismuth subnitrate) 1.7g 2. 醋酸 (AcOH) 20mL 3. 蒸馏水 (H2O) 80mL 4. 碘化钾 (KI) 40g5. 蒸馏水 (H2O) 100mL调配才略：A液: 1+2+3， B液：4+5， A液(5mL)+B液(5mL)+醋酸(20mL)+蒸馏水(70mL) 夹杂配成
香草醛显色 (广谱显色剂)原料： 1. 香草醛((Vanillin) 15g 2. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 2.5mL3. 酒精 (EtOH) 250mL调配才略：把1，2，3夹杂后配成，使用寿命较短。
碘/硅胶显色 (广谱显色剂)原料： 1. 碘(I2) 适量 2. 硅胶(SiO2) 适量 调配才略： 把1，2夹杂在密闭容器中静置，显色的时候径直只需要把TLC放进去即可，碘熏后，用水冲一下，不错增强显色后果，并不错固定住显色一段时期。
紫外灯-UV LAMP (适用于：共轭结构化合物)这个就不细说了。
5%的硫酸酒精（广谱显色剂，尤其是含有羟基等易于氧化的基团）
原料：
1. 98%的浓硫酸 1 g
2. 酒精 19 g
调配才略：将浓硫酸渐渐加入到酒精中，加入少许无水硫酸镁干燥。
水 (适用于：终末的技能！)在扫数的显色剂皆没用的情况下，把TLC略略浸点水后，对着光看，有可能看到化合物的点(有机化合物不溶于水)
茜素 (适用于：硼酸/硼酸酯类化合物)配制：1 M 的茜素丙酮溶液
显色的时候径直只需要把TLC放进去，在366nm紫外灯下不雅察有亮黄色荧光点。
茜素----一种高效的硼酸TLC显色剂
注：TLC板在浸润显色剂后，不一定能坐窝显色的，有的需要热烤才能显色！
